بهینه سازی بیان scfv آنتی بادی مونوکلونال موشی ضدپلاسمینوژن انسانی(a1d12) در e . coli

پایان نامه
چکیده

آنتی¬بادی a1d12 ضد پلاسمینوژن انسانی می¬باشد. این آنتی¬بادی می¬تواند سرعت تبدیل پلاسمینوژن به پلاسمین را به کمک فعال¬کننده¬های پلاسمینوژن افزایش دهد. آنتی¬بادی مذکور همراه با داروهای ترمبولایتیک پتانسیل بالایی برای درمان افراد مبتلا به بیماری های قلبی عروقی دارد. مشکلی که در رابطه با استفاده از این آنتی¬بادی وجود دارد ماهیت موشی آن می¬باشد که سبب پاسخ ایمنی می¬گردد. اولین گام در راستای انسانی کردن این آنتی¬بادی تهیه scfv فعال می¬باشد. به علت بیان بسیار پایین این scfv در مطالعه قبلی، دراین تحقیق توالی scfv مذکور پس از بهینه سازی کدونی در وکتورهای بیانی pet-26b و pet-3d ساب کلون شده و در سویه ها¬ی بیانی bl-21 و rosetta-gami2 از باکتری e.coli ترانسفورم گردید. بررسی نمونه های بیانی در هر دو مورد نشان داد که پروتئین بیان شده به صورت اجسام انکلوژنی است. از این رو مراحل فولد مجدد روی اجسام انکلوژنی از طریق دیالیز مرحله ای و بافر اکسایش- کاهش صورت گرفت. نتایج حاصل از الایزای رقابتی و کروماتوگرافی تمایلی نشان می دهد که حداقل بخشی از این اجسام انکلوژنی دارای فرم صحیح بوده و قادر به شناخت آنتی ژن مذکور هستند.

منابع مشابه

کلون و بیان نواحی متغیر آنتی بادی مونوکلونال ضد egfr در باکتری e. coli به منظور تولید آنتی بادی تک زنجیره ای

گیرنده فاکتور رشد اپیدرمال (egfr) یک پروتئین 170 کیلو دالتونی است که با اتصال به لیگاندهای فاکتور رشد اپیدرمی (egf) و فاکتور رشد تمایز دهندهtgf?) ) باعث القا تکثیر سلولی می شود. فعالسازی مسیر پیامدهی egfr در سلول های سرطانی منجر به تکثیر سلولی، آنژیوژنز، متاستاز و کاهش آپوپتوز می شود. جهت درمان سرطان نیاز به عوامل ضد سرطان جدیدی است که بتواند میان سلول های بدخیم و سلول های نرمال تمایز قائل شود....

کلونینگ و بیان scfv آنتی بادی منوکلونال موشی ضد پلاسمینوژن انسانی و بررسی فعالیت فیبرینولیتیک آن

امروزه آنتی بادی های منوکلونال از پر مصرف ترین داروهای بیولوژیک هستند. اولین گام در این راستا ساخت قطعات آنتی بادی (scfv) است که مزیت آن در داشتن اندازه کوچک، پاکسازی (کلیرانس) سریع از خون و نفوذپذیری بهتر به بافت ها است. آنتی بادی منوکلونال a1d12 که سبب افزایش هضم لخته به مقدار 50-3 برابر در حضور فعال کنندگان پلاسمینوژن می شود، کاندید خوبی به عنوان دارو در بیماران مبتلا به انسداد رگی است. بناب...

15 صفحه اول

تولید و خالص سازی آنتی بادی مونوکلونال موشی بر ضد فعال کننده بافتی پلاسمینوژن

فعال کننده بافتی پلاسمینوژن (t-pa) یک سرین پروتئازاست که زایموژن غیر فعال پلاسمینوژن را به فرم فعال آن یعنی پلاسمین تبدیل می کند که آنزیم اصلی حل شبکه های فیبرینی تشکیل شده در عروق می باشد.در برخی از پاتولوژی ها غلظت این آنزیم در خون افزایش یا کاهش می یا بد و اندازه گیری آن در خون می تواند در تشخیص نوع پاتولوژی کمک کند. به علاوه این مولکول تا به امروز تنها داروی تایید شده توسط fda برای درمان اف...

15 صفحه اول

زیر همسانه سازی و بیان ژن SO9 گیاه غاسول صابونی در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری

: غاسول صابونی دارای ایزوفرم های مختلف پروتئین ساپورین می باشد. ساپورین جزء پروتئین های غیر فعال کننده ریبوزومی (RIPs) است. ایزوفرم SO9 ساپورین ها، آدنین 4324 موجود در توالی حفاظت شده GAGA را دپورینه کرده و باعث اختلال در پروتئین سازی می‌گردد. در این مطالعه بیان ایزوفرم SO9 در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری انجام شد. روش بررسی: ژن SO9 سنتز شده، از پلاسمید pUC57-SO9 نوترکیب...

متن کامل

همسانه سازی و بیان ژن مولد پپتید AcAMP از قارچ Aspergillus clavatus در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری

Background: Antimicrobial peptides have been considered as the key to change in the current antibiotics. AcAMP, Antimicrobial peptide is one of them, which has been purified from the Aspergillus clavatus ES1 fungus, and its biochemical properties and characterization indicate that this peptide has unique properties. The aim of this study was to express the gene of AcAMP peptide in Escherichia c...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده زیست شناسی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023